稳定同位素内标是用 ²H、¹³C、¹⁵N 等稳定同位素取代目标分子上的特定原子形成的标记化合物，作为内标加入样品后可在 LC-MS 检测中校正前处理回收率、基质效应与仪器响应波动，是药代动力学（PK）定量分析中的核心计量工具。

为什么药代动力学检测需要稳定同位素内标

液相色谱-串联质谱已成为小分子药代动力学研究的主流定量平台。

在血浆、组织、尿液等复杂生物基质中，目标分析物在前处理回收率、基质离子化抑制、仪器响应漂移等多个环节都会出现显著波动。单纯使用外标法或结构类似物内标，难以满足 ±15% 准确度的痕量定量需求。

稳定同位素稀释法（isotope dilution, ID）将 ²H、¹³C 等稳定同位素标记的目标分子作为内标加入样品中。该内标与待测物在色谱保留、离子化效率、基质响应上几乎完全一致，可在全程同步校正回收率与基质效应，是国际公认的定量金标准。

氘代与 ¹³C 标记的选型对比

选型维度	氘代（D, ²H）	¹³C 标记
丰度等级	98 atom% D、99 atom% D	99 atom% ¹³C
质量偏移	n（每取代一个 D 增加 1 Da）	n（每取代一个 ¹³C 增加 1 Da）
同位素效应	极轻微（D-H 键能略高）	几乎无
色谱保留	与未标记化合物偏差 ≤ 2%	与未标记化合物几乎完全一致
适用场景	分子量 ≤ 500 Da、含易氘代位点、PK 与代谢物定量	长链脂质、复杂结构、对保留一致性要求高的场景
单位成本	工艺成熟、成本相对友好	合成路线长、成本较高

实操建议：分子量较小、含易氘代位点的小分子优先选氘代内标；长链脂质、胆固醇、胆酸等对保留一致性要求高的目标物推荐 ¹³C 标记。

氘代丰度的判据

丰度等级直接决定定量下限与同位素贡献的"本底噪声"。

按目标物 LOQ 区间判据

• 目标物 LOQ ≥ 1 ng/mL：98% D 即可满足

• 目标物 LOQ 0.1~1 ng/mL：98~99% D

• 目标物 LOQ < 0.1 ng/mL：建议 99% D 或 ¹³C 内标

经验阈值

• 目标物 M+0 天然 ¹³C 贡献（n 个碳）已抬升基线 → 99% D

• 目标物 M+1/M+2 与内标 m/z 通道重叠时（如氘代位点 n 与目标物碳数 n' 同时贡献 +1/+2 Da）→ 必须 99% D 或 ¹³C 内标

渝偲小分子药物氘代内标主力产品

项目号	中文名	CAS	标记	应用方向
F-19	华法林-d5	暂无	d5	抗凝药 PK 与血浆游离浓度定量
F-34	二甲双胍-d6	暂无	d6	糖尿病候选物 PK 与生物等效性研究
F-14	喹硫平-d8	暂无	d8	精神类药物血浆浓度监测
F-09	苯妥英-d10	1219803-13-0	d10	抗癫痫药物 PK 与治疗药物监测
F-11	茶碱-d4	344298-89-1	d4	支气管扩张剂 PK 与治疗药物监测
F-01	他克莫司-d2	1392038-53-7	d2	免疫抑制剂 PK 与全血浓度监测
F-24	MMAE-d8	1392038-63-9	d8	抗体偶联药物（ADC）PK 与 linker 切割研究
F-23	5-氟尿嘧啶-d3	16785-26-5	d3	抗肿瘤药物 PK 与体内代谢物研究
F-05	霉酚酸-d3	暂无	d3	器官移植免疫抑制治疗药物监测
F-06	地高辛-d3	1353872-55-7	d3	心血管药物 PK 与治疗药物监测

常见问答

Q1：稳定同位素内标如何选型？

A1：优先按目标物 LOQ 区间选丰度，分子量 ≤ 500 Da 优先氘代，长链脂质优先 ¹³C。

Q2：药代动力学检测用氘代内标还是 ¹³C 内标？

A2：常规小分子 PK 优先氘代，对保留一致性要求高或长链脂质场景推荐 ¹³C。

Q3：内标添加量一般为多少？

A3：通常按目标物预期浓度等量或 2~5 倍添加，具体需结合方法学验证优化。

Q4：氘代内标的丰度需要多少？

A4：LOQ ≥ 1 ng/mL 选 98% D；LOQ 0.1~1 ng/mL 选 98~99% D；LOQ < 0.1 ng/mL 选 99% D 或 ¹³C。

Q5：渝偲小分子药物氘代内标主力 SKU 有哪些？

A5：F-19 华法林-d5、F-34 二甲双胍-d6、F-14 喹硫平-d8、F-09 苯妥英-d10、F-11 茶碱-d4、F-01 他克莫司-d2、F-24 MMAE-d8 等。

声明：本系列产品仅用于科研实验用途，不可用于人体研究。